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黃曲霉B1檢測卡 操作說明
發(fā)布時間: 2019-05-15 點(diǎn)擊次數(shù): 2321次黃曲霉毒suB1(Aflatoxin B1簡寫為AFB1)是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃曲霉毒suB1對人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項目之一。本品的檢測靈敏度為5ng/ml。
【測定原理】
本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),通過單克隆抗體競爭結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB1單克隆抗體。
【樣品制備】
使用儀器:①感量0.1g的天平 ②玻璃器皿:蒸發(fā)皿或燒杯、量筒、滴管、移液管 ③小型粉碎機(jī)、④ 4000rpm離心機(jī)等。
1. 谷物:任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm離心1min得上清液,將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再根據(jù)樣品的種類用以下規(guī)定的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液??紤]不同樣品對黃曲霉毒suB1的高含量要求,請參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體:
谷物殘留*(ppb)
2.5
5
10
20
使用稀釋液體積(ml)
0.4
0.8
1.6
3.2
2. 飼料(以殘留*50ppb計算):任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm離心1min得上清液,將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再用2ml的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。如果殘留*是30ppb,則用1.2ml的稀釋液溶解;如果殘留*是40ppb,則用1.6ml的稀釋液溶解。
3. 食用油:稱2.0g油樣于小燒杯中,用8ml正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min,吸去上層正乙烷層,再加入4ml的乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,靜置或3000rpm離心得上清液,將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4. 醬油、醋、發(fā)酵酒:稱取25.0g樣品于小燒杯中,用5ml蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入20ml三氯甲烷,加塞輕輕振搖3min,靜置分層。放出下層三氯甲烷層,經(jīng)盛有約5g預(yù)先用三氯甲烷濕潤的無水Na2SO4過濾器于蒸發(fā)皿中,后用少量三氯甲烷洗滌過濾器,洗液并于蒸發(fā)皿中,用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后,準(zhǔn)確加入稀釋液,將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。
【操作步驟】
1. 在進(jìn)行檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫。
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請在1小時內(nèi)盡快使用。
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加3滴于加樣孔中,加樣后開始計時。
4. 結(jié)果應(yīng)在5min左右讀取,超過10min的時間判讀無
【結(jié)果判定】
1.陽性:位置C顯示出紅色線條,而位置 T不顯色時為陽性。陽性結(jié)果表明:AFB1含量超過樣品允許量。
2.陰性:位置C顯示出紅色線條,位置 T同時顯示出紅色線條,且T線顏色接近C線或者深于C線時,判為陰性。陰性結(jié)果表明:AFB1含量低于樣品允許量。
3.無效:位置C不顯示出紅色線條而位置 T顯示出紅色線條或位置C和位置 T均無線,該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。
【特別說明】
1.請按照操作步驟進(jìn)行測試,操作時請勿觸摸試紙顯示區(qū)。
2.如購買時發(fā)現(xiàn)過期,破損,污染,無效的產(chǎn)品,請到購買處進(jìn)行更換。
3.本品應(yīng)保存在干燥陰涼處(4--30℃),有效期12個月,生產(chǎn)日期見包裝。
4.本品為一次性產(chǎn)品,請勿重復(fù)使用。
5.如遇稀釋液不足,請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。
6.本品為篩選試劑,任何陽性結(jié)果請用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。
7.有條件的實驗室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品測試后作為判斷參考。